一、服务简介
在骆驼科的动物体内会产生一种独特的缺失轻链的重链抗体,该抗体只包含一个重链可变区VHH(variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody)和两个常规的CH2与CH3区。更重要的是单独克隆并表达出来的VHH结构具有与原重链抗体相当的结构稳定性以及与抗原的结合活性,是已知的可结合目标抗原的最小单位。VHH分子量只有12~15KDa,因此也被称为纳米抗体(Nanobody)。
纳米抗体具有分子量小、溶解度高、稳定性好等特点。纳米抗体同样含有3个CDR,其中CDR3对亲和力起到主要作用。与人源抗体相比,纳米抗体的CDR3更长,可以形成凸环结构,能够深入抗原内部、更好的结合抗原,因而亲和力更高。此外,纳米抗体的FR2的疏水残基被亲水残基取代,水溶性更好,不易形成聚集体。
基于噬菌体展示技术,我们自主开发了高效噬菌体建库方案,抗体库容量可以达到10E9;同时根据客户抗体的使用目的建立合适的筛选方案,最大程度保证筛选到最优抗体。
二、服务内容
(一)服务流程
步骤 | 服务内容 |
1. 动物免疫 | 1. 免疫前采血 2. 免疫3只羊驼 3. 血清效价检测 4. 最终采血 |
2. 噬菌体库构建 | 1. PBMC分离、抽提RNA 2. VHH基因扩增 3. 构建噬菌体展示抗体库 4. 噬菌体抗体库质量验证 |
3. 噬菌体库筛选 | 1. 阳性克隆筛选 2. 阳性克隆鉴定 3. 阳性克隆测序分析 |
4. 抗体重组表达 | 1. 构建真核表达载体 2. 抗体纯化 3. 功能验证(ELISA、WB、FACS等) |
(二)服务特色
1. 具有更高多样性和更大覆盖率的纳米抗体文库,库容量>10E9
2. 丰富的抗体筛选经验,最大程度保证筛选到最优抗体
3. 完善的抗体评价体系,包括ELISA、WB、FACS等
三、联系方式
单位名称:苏州中科细胞转化研究院
详细地址:苏州工业园区金鸡湖大道99号苏州纳米城西北区10幢301室
联系方式:0512-62800806、13962559397 brics@sibcb.ac.cn