羊驼纳米抗体制备

一、服务简介

在骆驼科的动物体内会产生一种独特的缺失轻链的重链抗体,该抗体只包含一个重链可变区VHH(variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody)和两个常规的CH2与CH3区。更重要的是单独克隆并表达出来的VHH结构具有与原重链抗体相当的结构稳定性以及与抗原的结合活性,是已知的可结合目标抗原的最小单位。VHH分子量只有12~15KDa,因此也被称为纳米抗体(Nanobody)。

纳米抗体具有分子量小、溶解度高、稳定性好等特点。纳米抗体同样含有3个CDR,其中CDR3对亲和力起到主要作用。与人源抗体相比,纳米抗体的CDR3更长,可以形成凸环结构,能够深入抗原内部、更好的结合抗原,因而亲和力更高。此外,纳米抗体的FR2的疏水残基被亲水残基取代,水溶性更好,不易形成聚集体。

基于噬菌体展示技术,我们自主开发了高效噬菌体建库方案,抗体库容量可以达到10E9;同时根据客户抗体的使用目的建立合适的筛选方案,最大程度保证筛选到最优抗体。

羊驼单克隆.png

二、服务内容

(一)服务流程

  步骤                

  服务内容                

  1. 动物免疫

  1. 免疫前采血

  2. 免疫3只羊驼

  3. 血清效价检测

  4. 最终采血

  2. 噬菌体库构建

  1. PBMC分离、抽提RNA

  2. VHH基因扩增

  3. 构建噬菌体展示抗体库

  4. 噬菌体抗体库质量验证

  3. 噬菌体库筛选

  1. 阳性克隆筛选

  2. 阳性克隆鉴定

  3. 阳性克隆测序分析

  4. 抗体重组表达 

  1. 构建真核表达载体

  2. 抗体纯化

  3. 功能验证(ELISA、WB、FACS等) 

(二)服务特色

1. 具有更高多样性和更大覆盖率的纳米抗体文库,库容量>10E9

2. 丰富的抗体筛选经验,最大程度保证筛选到最优抗体

3. 完善的抗体评价体系,包括ELISA、WB、FACS等

三、联系方式

单位名称:苏州中科细胞转化研究院

详细地址:苏州工业园区金鸡湖大道99号苏州纳米城西北区10幢301室

联系方式:0512-62800806、13962559397     brics@sibcb.ac.cn